多色免疫熒光為什么也叫做多重免疫組化？

Multiplex IHC，簡稱mIHC，直譯多重免疫組化，也叫多重熒光組化、多色免疫熒光、熒光多色標記等，到底是組化還是熒光？初次接觸的人有些懵，下面就要從它的原理給大家解釋下，為什么呈現的是熒光圖像而同時我們又稱之為組化又沒錯,要想充分明白這個問題，我們從以下幾個方面來解釋：

1-mIHC的基本原理

mIHC實驗是基于使用酪胺-熒光基團檢測開發的。其實驗步驟使用序列標記策略，每輪標記包含一抗孵育和二抗孵育。隨后是酪胺-熒光基團偶聯物沉淀。接下來將抗體hrp剝離，或在微波爐或者高溫中加熱，去除樣本中的抗體，所有沉淀的熒光基團，仍與樣本共價結合。mIHC的基本原理：內源性過氧化物酶封閉--抗原修復--一抗孵育--hrp二抗--顯色（熒光顯色沉淀），由此可見，這基本就是免疫組化的經典原理；只不過mIHC重復了組化的兩次（雙標） 三次（三標）甚至六次（六標七色），最后一步再做個負染dapi（類似于組化的蘇木素負染）！

2-為什么使用多重而非單染色IHC？

如果您的研究方向是探索不同細胞類型之間的交互作用，或者需要評價多個生物標志物和組織的表達或共定位，可以使用mIHC實驗。

3-mIHC實驗的抗體使用

使用經過高度驗證的抗體，確保得到可靠的結果。通常而言經過IHC-P驗證的抗體，同樣也能在mIHC中使用，但需要再進行實驗步驟優化。

   通過以上的解釋和分享，大家都了解了為什么多色免疫熒光也叫多重免疫組化或者mIHC了嗎？如果大家還是有疑問，可以隨時聯系我們茹創生物，我們給您做個性化一對一的講解！

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