多聚甲醛和甲醛固定液以及中性福爾馬林固定液如何來(lái)選擇？

實(shí)驗(yàn)當(dāng)中，很多實(shí)驗(yàn)需要用到固定液，比如流式 細(xì)胞爬片ICC IF   組織切片冰凍熒光染色 以及石蠟    切片 IHC IF 以及病理HE染色等，下面就多聚甲醛 福爾馬林 甲醛 這 三個(gè)代表性的名字以及衍生出來(lái)的固定液，來(lái)做一個(gè)簡(jiǎn)單的經(jīng)驗(yàn)分享：

甲醛是一種無(wú)色，強(qiáng)烈氣味的刺激性氣體，比空氣重，可溶于水，其35%--40%的水溶液被稱為福爾馬林，再加入10%-15的甲醇防止多聚化，否則甲醛會(huì)多聚形成多聚甲醛PFA。多聚甲醛式N=80100的低分子量聚合物。其產(chǎn)物為白色固體（粉末或者顆粒狀），不溶于乙醇 乙醚 和丙酮，溶于氫氧化鈉 等堿性溶液以及 低濃度酸液當(dāng)中。在加熱情況下，會(huì)慢慢釋放甲醛。平常 為了固定，需要用PBS將甲醛溶液稀釋到0.5%-4%。10%中性福爾馬林，實(shí)際就是4%有效成分的甲醛（含40%甲醛的福爾馬林稀釋10倍，然后 調(diào)PH值到偏弱堿性）。甲醛放置過(guò)久會(huì)慢慢酸化 形成甲酸 ，所以用偏堿性的 固定液，會(huì)有效防止這個(gè)情況發(fā)生（在保質(zhì)期內(nèi)）。基于以上的內(nèi)容，這里糾正一下一個(gè)常識(shí)性的錯(cuò)誤：大家都認(rèn)市面上買(mǎi)的4%多聚甲醛固定液是 多聚甲醛起著 固定作用，實(shí)際上，多聚甲醛式一種不能溶解的白色固體物質(zhì)，沒(méi)法直接用來(lái)固定任何樣本，我們平時(shí)所謂的多聚甲醛溶液，其本質(zhì)都是通過(guò)加熱方法獲得的不含甲醇的甲醛溶液，其有效成為為甲醛！